凝膠滲透色譜儀是一種常用的分離和純化生物大分子的工具。它基于凝膠過濾原理,通過不同孔徑大小的凝膠粒子,將待分離混合物中的分子按照其分子量大小分離開來。
凝膠滲透色譜儀由樣品進(jìn)樣系統(tǒng)、流動(dòng)相系統(tǒng)、柱體和檢測(cè)器組成。首先,待測(cè)樣品被注射到樣品進(jìn)樣系統(tǒng)中,然后被輸送到柱體中。柱體內(nèi)填充有大小不同的凝膠顆粒,這些凝膠顆粒構(gòu)成了一個(gè)分子篩。樣品分子在流動(dòng)相的推動(dòng)下進(jìn)入凝膠顆粒內(nèi)部,越小的分子會(huì)更容易穿過凝膠顆粒孔隙,而較大的分子則會(huì)受限于凝膠顆粒的孔隙,因此會(huì)留在凝膠顆粒外面形成一個(gè)分子堆積層。這樣,在柱體里就可以將不同分子大小的物質(zhì)進(jìn)行有效地分離。
檢測(cè)器通常采用紫外吸收檢測(cè)器,可以根據(jù)樣品分子的不同特性來選擇適當(dāng)?shù)牟ㄩL進(jìn)行檢測(cè)。通過分析檢測(cè)器輸出的信號(hào),我們可以確定分子的分子量大小以及其在樣品中的相對(duì)含量。
凝膠滲透色譜儀廣泛應(yīng)用于多種生物大分子的分離和純化,如蛋白質(zhì)、DNA、RNA等。它具有操作簡便、分離精度高、分離速度快等優(yōu)點(diǎn),是生物學(xué)和生物化學(xué)領(lǐng)域重要的工具之一。